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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前樣本的處理方法
發(fā)布時間： 2020-05-14 點(diǎn)擊次數(shù)： 1141次ELISA試劑盒得到*科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。在采集樣品之前必須有一個完整的計(jì)劃，清楚要測試的成分是否足夠穩(wěn)定。同一回采集的ELISA樣本被及時存放在4℃。對于第二天測試的樣本，樣品應(yīng)在加載后的-20℃及時冷凍。如果有條件，將它們冷凍到-70℃。標(biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。液體標(biāo)本：包括血清、血漿、尿液、胸水和腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等。
1、血清
室溫自然凝固10-20分鐘后，將血液離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集清洗。如果保存過程中出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2、等離子體
應(yīng)根據(jù)樣品的要求選用EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑?；旌?0-20分鐘后，離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，仔細(xì)收集，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3、尿液
用無菌管收集，離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集清洗。如果保存過程中有沉淀形成，應(yīng)再次離心。根據(jù)這一做法，以胸水、胸水和腦脊液(腦脊液)為參考。
4、細(xì)胞培養(yǎng)上清
檢測分泌成分時，用無菌管收集，離心20分鐘(每分鐘2000-3000轉(zhuǎn))，仔細(xì)收集。
5、培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)組分時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度約為100萬/ml。通過反復(fù)凍融或添加組織蛋白提取劑，細(xì)胞被破壞，細(xì)胞內(nèi)成分釋放。離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集清洗。如果保存過程中有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6、組織標(biāo)本
切完標(biāo)本后，稱重。加入一定量的PBS，pH7.4。用液氮快速冷凍。試樣熔化后溫度保持在2-8℃。加入一定量的PBS(pH7.4)或組織蛋白提取劑，樣品用手或勻漿機(jī)均勻化。離心20分鐘左右(2000-3000 rpm)。仔細(xì)收集清洗。一份經(jīng)過單獨(dú)加載后將進(jìn)行測試，其余的將被冷凍并存放。(內(nèi)容僅供參考，如有問題或遇到問題請?jiān)诰€咨詢，我們會竭誠為您服務(wù))
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