ELISA試劑盒法是免疫診斷中的一項新技術,現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。
因此ELISA試劑盒原理在生物醫(yī)學各領域的應用范圍日益擴大,可概括四個方面:
1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
那么我們在選購ELISA試劑盒時應注意那些問題呢?
1、衛(wèi)生部規(guī)定乙肝,丙肝及血型試劑必須使用經(jīng)衛(wèi)生部生物制品檢定所檢定合格,并貼有防偽標簽,試劑應從靈敏度,精密度,穩(wěn)定性,簡便性,特異性,安全性及經(jīng)濟性作出全面的評價。指試劑正確檢定不存在的被檢物質的能力(無假陽性),取決于包被抗原(體)及標記抗原(體)的純度及特異性。
2、特異性:靈敏度:包括1)為試劑檢出被檢物質的zui低量的能力;2)為試劑對人群或大量樣品中陽性檢出的能力(假陰性越少越好),取決于包被物的全面性。
3、精密度:ELISA試劑一般指其批內CV,其值應小于15%;定量試劑應同時考察線性范圍
4、簡便性:指在不影響試劑的前三項指標的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性試驗中結果判斷簡單明了,)定量試驗結果計算也應簡單
5、穩(wěn)定性:試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間,一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存,定期測定其靈敏度,特異性和精密度等指標,直到其質量指標開始下降為止,通常認為37℃每穩(wěn)定一天相當于4-10℃保存一個半月。
6、經(jīng)濟性:試劑在同等質量條件下通過大規(guī)模生產或技術進步降低成本而市場價格比較合理。
7、安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害傳染性。