ELISA試劑盒實驗步驟多,新手操作者難免出錯。這些錯誤很多都是細節(jié)不夠造成的。減少這種錯誤的方法有很多,比如在實驗過程中少說話,防止唾液落入酶標.當然,我們也要學會探索自己的問題,找出原因.那么,我們?nèi)绾胃倪MELISA試劑盒實驗中的錯誤呢?
1 評價試劑的實用性試劑的穩(wěn)定性對準確度非常重要.在啟用ELISA試劑盒之前,應重復檢測陰性和陽性對照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能使用.
2 操作前仔細閱讀ELISA試劑盒說明書嚴格按照說明書要求進行標準化操作.不同批號的試劑不混合.值得改進的是,只有經(jīng)過反復的試驗,如洗盤的數(shù)量,才能加以改進.
3 加樣要準確 快速樣品添加的不準確度和酶制劑用量的不確定度直接影響顯色效果.此外,顯色深度和A值的確定與顯色劑和終液體的加入量有關,因此樣品的裝載應謹慎.需要在一定時間內(nèi)完成采樣的實驗,如果采樣速度慢,會出現(xiàn)誤差,試劑會暴露很長時間,特別是當室溫過高時,保質(zhì)期會縮短甚至失效.
4 檢驗技術人員應具備實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗.檢測技術人員能夠熟練操作實驗儀器儀表,具有一定的總結(jié)和分析問題的能力,能及時 妥善地解決ELISA試劑盒實驗中出現(xiàn)的意外情況.
5 洗滌要*洗版不*,酶偶聯(lián)物的背景顏色為假陽性.此外,清潔劑應該是新鮮的,可以隨時使用.舊的洗滌劑會增加背景,也可能出現(xiàn)假陽性.
6 嚴控ELISA試劑盒實驗反應時間ELISA試劑盒反應時間過長,酶被滅活,反應時間過短,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能*結(jié)合,產(chǎn)物結(jié)構松散不穩(wěn)定,易清洗,易產(chǎn)生假陰性.